IVF-laboratoriet

När äggen är mogna är det dags för ägguttag. Med hjälp av ultraljud via slidan kan läkaren se de vätskefyllda folliklarna i äggstockarna. Med en tunn nål som är kopplad till ultraljudsproben sugs vätskan ur folliklarna och samlas upp i rör som embryologen tar hand om.

Äggen hittas i mikroskop och sköljs rena från blod och vätska med en näringslösning. Under ägguttaget kan patienten följa embryologens arbete via mikroskopbilden på en TV-skärm. Alla ägg samlas in och förvaras i ett värmeskåp tills de ska kombineras med spermierna.

Det finns två olika metoder för att befrukta ägg vid en IVF-behandling. Om mannen har tillräckligt många spermier med god rörlighet används standard-IVF, där spermierna själva befruktar äggen. Om spermiekvaliteten är nedsatt används mikroinjektion (ICSI), där en spermie förs in i ägget med hjälp av en tunn nål.

Standard IVF

Äggen placeras i en skål tillsammans med spermierna. Skålen förvaras över natten i ett värmeskåp, där spermierna själva ska tränga in i äggen.

Mikroinjektion (ICSI)

ICSI står för intracytoplasmatisk spermieinjektion och innebär att spermien förs in direkt i ägget med en tunn nål. Ägget måste förberedas innan ICSI kan utföras. Näringscellerna runt ägget tas bort genom att ett enzym tillsätts.

ICSI utförs i ett mikroskop som är utrustat med hållare för tunna pipetter – en för att hålla fast ägget och en för att injicera spermien. För att kunna göra de mycket små rörelserna styrs pipetterna med joysticks. Efter injektionen placeras äggen i droppar av näringslösning och förvaras i ett värmeskåp.

En normal befruktning sker oftast samma dag som inseminationen eller spermieinjektionen. Pronukleerna bildas relativt snabbt och kan bekräftas följande morgon. Senare samma dag smälter pronukleerna samman och den första celldelningen sker. Under de följande dagarna fortsätter embryot att dela sig.

Två dagar efter ägguttaget har embryot vanligtvis delat sig till mellan två och sex celler, och på tredje dagen har det ofta mellan sex och tio celler.

Efter fem till sex dagars odling bör embryot ha nått blastocyststadiet och innehålla 150–200 celler. Embryot, som då kallas blastocyst, har ökat i storlek och cellerna har delat sig i en inre cellmassa (som senare blir fosterceller) och trophektodermceller (som senare blir moderkakan). Äggskalet har också förändrats och blivit tunnare.

Innan blastocysten fäster vid livmoderslemhinnan bildas ett hål i äggskalet och blastocysten kläcks ur sitt skal. Om behandlingen ger fem eller fler befruktade ägg väljer vi oftast att fortsätta odla alla. De embryon som utvecklas till blastocyster ger en ökad chans till graviditet.

Blastocystodling kallas även långtidsodling.

I många behandlingar utvecklas flera embryon av god kvalitet. Överskottsembryon kan frysas och användas i framtida behandlingar. Enligt svensk lag får embryon frysas i maximalt 10 år från dagen de fryses in.

Det finns två olika frysningsmetoder. Den ena bygger på att embryona kyls långsamt under kontrollerade former, vilket kallas långsam nedfrysning. Den andra metoden bygger på blixtsnabb nedkylning och kallas vitrifiering. Vi använder endast vitrifiering, eftersom det ger bäst överlevnad för både blastocyster och obefruktade ägg.

Oavsett metod förvaras embryona i tankar med flytande kväve (-196 °C).

Vitrifiering (ägg och blastocyster)

Embryon som odlats under lång tid och obefruktade ägg fryses med en teknik som kallas vitrifiering. Det är en relativt ny metod som Livio – Fertility Center Göteborg, som första klinik i Sverige, har använt sedan 2005 (blastocyster) respektive 2011 (obefruktade ägg).

Vid vitrifiering förbereds blastocysten genom att man gör ett litet hål i äggskalet med hjälp av en laser, så att cellerna lättare kan skyddas under den snabba frysningen.

Blastocysten skyddas genom en process som kallas vitrifiering. Den börjar med att blastocysten placeras i en viskös lösning och läggs i en kavitetsform på en spatula, som sedan förs in i ett litet sugrör och placeras i flytande kväve. Hela processen tar cirka en minut. Äggen behandlas på ett liknande sätt, men med vissa viktiga skillnader i metoden.

Embryon och spermier förvaras och odlas i inkubatorer där pH, fuktighet, syreinnehåll och temperatur är anpassade för att efterlikna kroppens egna förhållanden. Inkubatorerna kontrolleras regelbundet och dokumenteras i vårt kvalitetssystem. Allt arbete med embryon och spermier sker på varmplattor i ett sterilt arbetsbänk.

För att upprätthålla en ren miljö har laboratoriet ett särskilt ventilationssystem och luftslussar.